lnvsc1 感受态细胞100ul*10操作说明书
    感受态细胞在冰中缓慢融化，插入冰中8分钟内加入目标dna，不可在冰中放置时间过长，长时间存放会降低转化效率。接下来介绍 小编为大家介绍  lnvsc1 感受态细胞100ul*10操作说明书。
注意事项
1．感受态细胞一定要用干冰运输。感受态细胞应在 -80℃下保存，不可反复冻融和放置时间过长，以免降低感受态细胞的转化效率。
2．转化所有步骤均在无菌条件下操作。
3．包装中有0.1ng/μl的puc19dna，供对照试验使用
操作步骤：
1．取感受态细胞置于冰浴中。一次转化感受态细胞的建议用量为50-100可以根据实际情况分装使用。以下实验以50μl感受态细胞为例。
2．待感受态细胞融化后，向感受态细胞悬液中加入目的dna（根据实际情况加入适量的dna，通常100        μl感受态细胞能够被1         ng超螺旋质粒dna所饱和），用移液器轻轻吹打混匀，冰浴30分钟。
3．42℃热击45秒，迅速将离心管转移到冰浴中，冰上静置2-3分钟
4．每个离心管中加入450μl无菌的soc或lb培养基（不含抗生素），混匀后置于37℃摇床，150rpm振荡培养45分钟使菌体复苏
5．根据实验需求，取适量已转化的感受态细胞，加到含相应抗生素的或lb固体琼脂培养基上，用无菌的涂布棒将细胞均匀涂开，将平板置于37℃直至液体被吸收，倒置培养，37℃培养12-16小时。

---

上海抚生实业有限公司